Inhibition des Tumorwachstums durch Vakzinierung mit IL–12/AFP-exprimierenden dendritischen Zellen in einem murinen HCC-Modell

Einleitung: Dendritische Zellen (DC) können spezifische T-Zellen gegen Tumorantigene wie das AFP, stark stimulieren. Ihr Einsatz gegen das HCC hat allerdings bisher nur begrenzten Erfolg gezeigt. Die Verwendung von IL–12 könnte die antitumorale Wirkung von DC steigern. In dieser Arbeit wurden AFP beladene DC mit einem IL–12-Adenovirus (Ad) zur Vakzinierung von Mäusen gegen das HCC transduziert. Methodik: Es wurden vier Ad verwendet: Ad-mAFP (mit AFP als Transgen), Ad-IL–12 (mit IL–12), Ad-luc (mit Luziferase) und Ad-LacZ (mit LacZ). DC wurden aus dem Knochenmark von C3H-Mäusen gewonnen. Am Tag 6 wurden die DC adenoviral transduziert. Die Expression von DC-Oberflächenmarkern wurde mittels Durchflusszytometrie bestimmt. Durch ELISA wurde die IL–12-Expression gemessen. C3H-Mäuse wurden mit 5×10⁵ IL–12- oder LacZ-exprimierenden DC plus 5×10⁵ AFP-exprimierenden DC mittels s.c. Injektion immunisiert. Eine Woche nach der Vakzinierung erfolgte die Injektion AFP-positiver oder -negativer HCC-Zellen. Die Transgenexpression adenoviral transduzierter DC wurde mittels bioluminescence imaging in vivo verfolgt. Ergebnisse: Ad-IL12-transduzierte DC wiesen eine dosisabhängige Expression von IL–12 auf. Die Expression von CD40, CD80 und CD86 wurde trotz starker adenoviraler Transduktion nicht herabreguliert. Eine Woche nach der Vakzinierung konnte die Transgenexpression transduzierter DC (Ad-luc) in vivo nachgewiesen werden. Darüber hinaus zeigten adenoviral transduzierte DC eine Migration in die ipsilaterale Lymphknoten. Drei Wochen nach der Tumorinduktion war das Tumorvolumen bei Mäusen, welchen mit Ad-IL–12/Ad-AFP-transduzierten DC immunisiert worden waren, signifikant kleiner als das Tumorvolumen von Mäusen, die mit Ad-LacZ/Ad-AFP-infizierten DC vakziniert worden waren (245,2±128,8mm³ vs. 894,3±224,2mm³; p<0,05). Die Vakzinierung mit Ad-AFP/IL–12-DC zeigte eine stärkere prophylaktische Wirkung gegen das Entstehen AFP-positiver Tumoren als gegen AFP-negative HCC: 100% vs. 25% der Mäuse waren tumorfrei zwei Wochen nach Tumorinduktion. Diskussion: Immunisierung mit Ad-IL12/AFP-transduzierten DC konnte das Wachstum AFP-positiver HCC signifikant inhibieren. Die Interaktion zwischen AFP-beladenen DC und Th1-Lymphozyten scheint abhängig von der DC-Migration in die Lymphknoten zu sein. Die Transduktion mit Ad-IL–12 stellt eine Verbesserung der antitumoralen Wirkung von AFP-beladenen DC gegen das HCC dar.