c-Src inhibiert CD–95 und TRAIL induzierte Apoptose

Hintergrund: Der Verlust der Empfänglichkeit für Apoptosesignale ist ein zentraler Schritt der Karzinogenese. Bei vielen Tumoren wurde ein Versagen der Apoptoseinduktion durch membranständige Todesrezeptoren wie CD–95 und TRAIL beschrieben. Seit Entdeckung des Protoonkogens c-Src wurde bereits eine Überexpression von c-Src in vielen Tumoren nachgewiesen, und die pathophysiologische Rolle von c-Src wurde mit vielen Aspekten der Karzinogenese wie z.B Zellproliferation, Invasivität und Angiogenese in Verbindung gebracht. Die genauen Mechanismus, mittels derer c-Src zur Karzinogenese beiträgt, sind jedoch bis heute nicht eindeutig geklärt.

Fragestellung und Methoden: In unserer Studie haben wir untersucht, ob c-Src durch Beeinflussung von rezeptorvermittelter Apoptose das Überleben von Tumorzellen beeinflusst. Zellen wurden mit anti-Apo1 oder TRAIL behandelt, um memeranständige Apoptoserezeptoren zu stimulieren. Gleichzeitig wurde die Aktivität von c-Src entweder durch den Src-Inhibtor PP2 oder siRNA gegen c-Src inhibiert. Apoptose wurde mittles Durchflusszytometrie und Caspaspaseaktivierung im Western Blot gemessen.

Ergebnisse: Wir konnten zeigen, dass in Kolonkarzinom- und Hepatom-Zellinien, die mit anti-APO–1 oder TRAIL stimuliert wurden, die Apoptoseraten durch eine gleichzeitige pharmakologische Inhibierung von c-Src mittels PP2 deutlich eröht wurde. Die alleinige Stimulation mit TRAIL induzierte einen Anstieg der Apoptoserate um 10%. Gleichzeitige Gabe von PP2 führte zu einer Steigerung der Apoptose auf 80%. Vergleichbare Ergebnisse wurden mit siRNA gegen c-Src erzielt. c-Src Inhibition führte zu verstärkter Spaltung von Caspase 3 und Caspase 8. Herabregulation von Caspase 8 mittels siRNA hob den synergistischen Effekt von Src-Inhibition und Rezeptorstimulation auf. Die Sensitivierung von Zellen für Apoptosesignale nach Ausschalten von c-Src war unabhängig vom p53-Status.

Schlussfolgerung: Diese Ergebnisse demonstrieren, dass c-Src durch Unterdrückung der Apoptose zur Karzinogenese und Aufrechterhaltung des Krebsphänotyps beiträgt. Die pharmakologische Inhibition von c-Src bei gleichzeitiger Stimulation von Apoptosesignalwegen stellt daher eine interessante neue Strategie in der Tumortherapie da.