Die Auswirkung Zytoskelett-modulierender Substanzen auf das Wachstumsverhalten und die Morphologie von Pankreaskarzinomzellen

Hintergrund: Das Zytoskelett beeinflusst die Adhäsion und die Motilität von Zellen, was bei der Metastasierung von Karzinomzellen ein wichtige Rolle spielt. Der Auf- und Abbau der Zytoskelett-Elemente ist von dem Vorhandensein bzw. Fehlen Filament-assoziierter Proteine und von extrazellulären Signalen abhängig. Aus einem Pankreaskarzinom wurden zwei Zellinien isoliert, von denen die eine, PaTu 8988S, das Zelladhäsions-Protein E-Cadherin exprimiert und die andere, PaTu 8988T, nicht. Diese beiden Zellinien weisen eine unterschiedliche Morphologie und ein unterschiedliches Proliferationsverhalten auf. Sie dienen als Modell, die Auswirkungen des Cadherins auf das Zytoskelett und auf das Metastasierungspotential der Zellen zu untersuchen. Methoden: PaTu 8988T-Zellen wurden mit retroviralen E-Cadherin-Expressionskonstrukten transfiziert, selektiert und kloniert. Die Expression von E-Cadherin wurde durch Western Blot-Analyse und Immunfluoreszenz-Färbung charakterisiert. Mittels Latrunculin und Colchicin wurden die Zytoskelett-Filamente Aktin und Tubulin depolymerisiert und die Auswirkung auf die Zell-Morphologie im Raster-Elektronen-Mikroskop untersucht. Der Einfluss von Taxol auf die Proliferation der Zellen wurde durch MTT-Wachstums-Assays ermittelt. Ergebnisse: Die Reexpression von E-Cadherin in PaTu 8988T-Zellen bewirkt keine Veränderung der Proliferation, aber eine Einschränkung der Migrationsfähigkeit und gravierende Unterschiede in der Morphologie. E-Cadherin exprimierende PaTu 8988T-Zellen sind aussergewöhnlich flach, während PaTu 8988S und PaTu 8988T-Zellen eine kugelförmige Morphologie epithelialer Zellen zeigen. Die Inkubation mit 5 nM Taxol verhinderte eine Proliferation der Tumorzellen. Es zeigten sich keine Unterschiede zwischen E-Cadherin reexprimierenden Zellen und den Wildtypzellen. Schlussfolgerungen: Die Veränderung der Morphologie durch die Reexpression von E-Cadherin in PaTu 8988T-Zellen zeigt, dass E-Cadherin an der Regulation und Organisation des Zytoskeletts beteiligt ist. Taxol ist ein potenter Inhibitor des Wachstums von Pankreas-Tumorzellen. Die Wirkung von Taxol ist unabhängig von der E-Cadherin-Expression und der Aktin-Organisation.

Keywords: E-Cadherin, Proliferation, Zytoskelett