MK–2-Gendeletion reduziert die Expression und Sekretion von IL–6 in isolierten Azini der Maus

TNF-α und IL–6 sind als pro-inflammatorische Zytokine an der Pathogenese der Pankreatitis wesentlich beteiligt. Der p38/MK–2- Signaltransduktionsweg ist maßgeblich an der Regulation der Zytokin- und Genexpression in verschiedenen Zellen beteiligt. In früheren Untersuchungen konnten wir bereits zeigen, dass die Hemmung dieses Signalweges die Entstehung und Folgen der akuten Pankreatitis in einem MK–2 (-/-) Mausmodell der Caerulein-induzierten Pankreatitis signifikant vermindert. Die MK–2 knockout Mäuse zeigten signifikant niedrigere Serumspiegel für TNF-α und IL–6. Um die zugrunde liegenden Mechanismen näher zu identifizieren, untersuchten wir jetzt isolierte Azini von MK–2 (-/-) Mäusen im Vergleich zu Wildtyp (C57/bl) Azinuszellen. Des Weiteren untersuchten wir Veränderungen in vivo zu einem sehr frühen Untersuchungszeitpunkt. Hierzu wurden 50µg/kg Caerulein i.p. appliziert und die Tiere 1 Std. später dekapitiert. Analysierte biochemische Parameter umfassten dabei die Bestimmung von Lipase, der Trypsinaktivierung und die Serum- und Gewebekonzentrationen von TNF-α und IL–6. Die mRNA-Spiegel aus dem Pankreas für TNF-α und IL–6 wurden mittels quant. PCR bestimmt. Mausazini wurden durch Kollagenaseverdau isoliert und anschl. mit CCK für 30–60min stimuliert. In vivo fanden sich signifikant verminderte Serumspiegel für IL–6 bei kaum messbaren TNF-α Spiegeln in MK–2 (-/-) Mäusen nach einer Stunde. Unterschiede in der Trypsinaktivierung zwischen MK–2 (-/-) und Wildtyp Mäusen waren nicht zu beobachten. In isolierten MK–2 (-/-) Azini fand sich ebenfalls eine verminderte IL–6 Proteinexpression und Sekretion nach CCK-Stimulation. Untersuchungen der Amylasesekretion nach dosisabhängiger Stimulation mit CCK ergaben jedoch keine signifikanten Unterschiede zwischen Wildtyp und MK–2 Azini. Sowohl in vivo als auch in isolierten Azini konnte eine verminderte IL–6 mRNA Expression in MK–2 (-/-) Mäusen gezeigt werden. Zusammenfassend lässt sich festhalten, dass die Deletion der MK–2 im Modell der Caerulein-induzierten Pankreatitis entzündungshemmend wirkt. Ursache ist eine verminderte Expression und Sekretion von IL–6 in den Pankreasazini. TNF-α spielt wahrscheinlich nur eine permissive Rolle bei der Vermittlung pro-inflammatorischer Effekte während einer Pankreatitis.

Keywords: IL-6, MK-2, Pankreatitis, Zytokine