Polymorphismen des Surfactant Protein-D (SP-D)-Gens bei chronisch-entzündlichen Darmerkrankungen

Einleitung: Die Surfactant Proteine (SP-A, SP-D) gehören neben dem Mannosebindenden Lektin (MBL) zu den Collektinen, einer Familie von Proteinen des angeborenen humoralen Immunsystem, welche im Plasma und an Schleimhautoberflächen vorkommen und zu den Pathogen-Recognition Receptors (PRRs) gehören, welche spezielle mikrobielle Strukturen, die Pathogen-Associated Molecular Patterns (PAMPs), erkennen (1). Während der Hauptproduktionsort der Surfactant Proteine die Lunge ist, wird SP-D zusätzlich auf verschiedenen mukosalen Oberflächen, unter anderem auch im Gastrointestinaltrakt, exprimiert (2). Es wurden im SP-D-Gen die drei zu Änderungen der Aminosäuresequenz führenden Polymorphismen A11 Met→Thr (T/C), A160 Ala→Thr (G/A) und A270 Ser→Thr (T/A) beschrieben (3–5). Fragestellung: Es sollte untersucht werden, ob eine Assoziation dieser Polymorphismen mit chronisch-entzündlichen Darmerkrankungen besteht. Beim M. Crohn sollte eine Stratifikation nach den der 3häufigsten Mutationen im CARD15/NOD2-Gen erfolgen. Material und Methoden: Die Studienpopulation bestand aus 174 Patienten mit M. Crohn, 137 Patienten mit Colitis ulcerosa sowie 265 Kontrollindividuen. Die Genotypisierung erfolgte mittels PCR und Restriktionsfragmentanalyse. Zur statistischen Auswertung wurde der χ²-Test verwendet. Ergebnisse: Die Allel- und Genotypfrequenzen der drei untersuchten Polymorphismen zeigten keine signifikanten Assoziationen zwischen M. Crohn oder Colitis ulcerosa im Vergleich zur Kontrollgruppe (Tabellen 1 und 2). Nach Stratifikation hinsichtlich der 3häufigsten im CARD15/NOD2-Gen beim M. Crohn ergab sich eine signifikant höhere Frequenz des Genotyps TA des Polymorphism A270 bei gleichzeitigem Vorliegen von CARD15/NOD2-Mutationen (Tabelle 3). Schlussfolgerung: Genpolymorphismen im SP-D-Gen wurden im Rahmen dieser Studie erstmalig bei chronisch-entzündlichen Darmerkrankungen untersucht. Es fand sich dabei eine signifikant höhere Frequenz des Genotyps TA des Polymorphismus A270 bei gleichzeitigem Vorliegen von CARD15/NOD2-Mutationen. Aus genetischer Sicht hat sich somit ein Hinweis auf eine Bedeutung von SP-D in der Pathogenese des M. Crohn ergeben. Weiteren Aufschluss soll auch eine Untersuchung der SP-D Expression in Schleimhautbiopsien geben.

Tabelle 1 Allelfrequenzen der SP-D-Polymorphismen bei M. Crohn und C. ulcerosa

Polymorphismus	Allel	M. Crohn(n=348)	C. ulcerosa(n=274)	Kontrollgruppe(n=530)
A11 Met→Thr	T	221 (63,5%)	153 (56,9%)	319 (60,2%)
	C	127 (36,5%)	118 (43,1%)	211 (38,8%)
A160 Ala→Thr	G	199 (57,2%)	152 (55,5%)	304 (57,4%)
	A	149 (42,8%)	122 (44,5%)	226 (42,6%)
A270 Ser→Thr	T	323 (92,8%)	256 (93,4%)	489 (92,3%)
	A	25 (7,2%)	18 (6,6%)	41 (7,7%)

Tabelle 2 Genotypfrequenzen der SP-D-Polymorphismen bei M. Crohn und C. ulcerosa

Polymorphismus	Genotyp	M. Crohn(n=174)	C. ulcerosa(n=137)	Kontrollgruppe(n=265)
A11 Met→Thr	TT	73 (42,0%)	44 (32,1%)	103 (38,9%)
	TC	75 (43,1%)	68 (49,6%)	113 (42,6%)
	CC	26 (14,9%)	25 (18,3%)	49 (18,5%)
A160 Ala→Thr	GG	55 (31,6%)	43 (31,4%)	92 (34,7%)
	GA	89 (51,2%)	66 (48,2%)	120 (45,3%)
	AA	30 (17,2%)	28 (20,4%)	53 (20,0%)
A270 Ser→Thr	TT	150 (86,2%)	119 (86,9%)	228 (86,0%)
	TA	23 (13,2%)	18 (13,1%)	33 (12,5%)
	AA	1 (0,6%)	0 (0%)	4 (1,5%)

Tabelle 3 Frequenzen von Genotypen der SP-D-Polymorphismen beim M. Crohn stratifiziert nach dem Vorhandensein von Mutationen im CARD15/NOD2-Gen (*p=0.03266)

Polymorphismus	Genotyp	CARD15/NOD2 +(n=74)	CARD15/NOD2 –(n=100)
A11 Met→Thr	TT	27 (36,5%)	46 (46,0%)
	TC	33 (44,6%)	42 (42,0%)
	CC	14 (18,9%)	12 (12,0%)
A160 Ala→Thr	GG	26 (35,1%)	29 (29,0%)
	GA	37 (50,0%)	52 (52,0%)
	AA	11 (14,9%)	19 (19,0%)
A270 Ser→Thr	TT	59 (79,7%)	91 (91,0%)
	TA	15 (20,3%)*	8 (8,0%)
	AA	0 (0,0%)	1 (1,0%)

Keywords: Assoziation, CARD15/NOD2-Mutationen, Colitis ulcerosa, Collektine, Genpolymorphismen, Morbus Crohn, Pathogen-Associated Molecular Patterns, Pathogen-Recognition Receptor, Surfactant-Protein-D, angeborenes Immunsystem