Pneumologie 2005; 59 - P453
DOI: 10.1055/s-2005-864532

Biologische Funktion von Lysophosphatidsäure in eosinophilen Granulozyten

M Idzko 1, M Laut 1, D Myrtek 1, J Müller-Quernheim 1, S Sorichter 1
  • 1Universitätsklinik Freiburg, Abteilung Pneumologie

Eosinophile Granulozyten (EOS) spielen eine zentrale Rolle in der Pathogenese parasitärer Infektionen und atopischer Erkrankungen. Lysophosphatidsäure (LPA) ist ein natürliches, wasserlösliches Phospholipid, welches durch die sezernierte Typ II Phospholipase A2 gebildet wird. Interessanterweise konnten erhöhte Konzentrationen von Typ II Phospholipase A2 und LPA in der nasalen Flüssigkeit von allergischen Patienten nach lokaler Provokation gefunden werden. Wir untersuchten daher die biologische Aktivität von LPA auf humane EOS. Methode: Die EOS wurden mithilfe von Dichtegradientenzentrifugation und einer Negativ-Selektion mit anti-CD16 gekoppelten Dynabeads aus dem Blut von gesunden Probanden isoliert. Das intrazelluläre Kalzium [Ca2+]iz wurde in Fura-2 markierten EOS mit einem digitalen Fluoreszenz-Mikroskop Attofluor gemessen. Die Aktin-Polymerisation wurde durchflusszytometrisch nach NBD-Phallacidin-Färbung bestimmt. Die Chemotaxis-Messungen erfolgten mittels Boydenkammertechink. Die Produktion reaktiver Sauerstoffmetabolite (RSM) wurde mittels Chemilumineszenz bestimmt. Resultate: LPA führt konzentrationsabhänging zu einem schnellen Anstieg des [Ca2+]iz in EOS. Veränderungen im Zytoskelett stellen eine Voraussetzung für die Migration von Zellen dar. Daher wurde als nächstes der Einfluss von LPA auf die Aktinpolymerization in EOS untersucht. Auch hier zeigte sich das LPA konzentrationsabhängig zu einer Aktinpolymeriaztion führt. Anschließend analysierten wir die Wirkung von LPA auf die zielgerichtete Migration von EOS. Hier zeigte sich, dass LPA ein Chemotaxin für EOS ist. Darüberhinaus führte die Stimulation der EOS mit LPA zu einer Steigerung der Produktion von RSM in EOS. Schlussfolgerung: Wir konnten zeigen dass die Stimulation der EOS mit LPA zu einem Anstieg des [Ca2+]iz, der Aktinpolymerization, der Chemotaxis und der Produktion von RSM führt. LPA könnte somit eine Rolle bei der Modulation von EOS im Rahmen der asthmatischen Entzündungsreaktion spielen.