Sequenzspezifische Suppression Hypoxie-induzierbarer Transkriptionsfaktoren (HIFs) durch RNA interference in vitro und in vivo

In dieser Studie wurden zunächst siRNA Motive für die Hypoxie-induzierbaren Transkriptionsfaktoren (HIF)-1α und –2α selektiert und auf die Lungen-Adenokarzinoma Zelllinie A549 angewendet. Transfektion der A549 Zellen mit HIF-1α und HIF-2α siRNA supprimierte die jeweilige mRNA- (realtime RT-PCR) und Protein-Expression (Western-Blot/Immunzytochemie) in Hypoxie. Korrespondierend zeigte sich eine mRNA-Reduktion der HIF-abhängigen Zielgene (Phosphoglycerat Kinase (PGK) und vaskulärer-endothelialer-Wachstums-Faktor (VEGF) in HIF-siRNA behandelten Zellen. Weiterhin konnte ein Hypoxie-induzierter Wachstumsstopp der A549 Zellen in HIF-1α siRNA behandelten Zellen aufgehoben werden. In einem weiteren Ansatz wurden A549- und Lewis Lung Carcinoma (LLC)-Zellen stabil mit Luciferase transfiziert. Das Luciferase-Protein wird von anderen Zellen nicht gebildet. Nach Injektion in C57BL/6N-Mäuse konnte das Tumorwachstum dieser stabil transfizierten Zellen in vivo über ein Lumineszenz Verfahren quantifiziert sowie immunhistochemisch lokalisiert werden. Erste Ergebnisse zur Transfektion der Tumorzellen in vivo mittel sequenzspezifischer Luciferae-siRNA und HIF-siRNA werden präsentiert. RNA interference ist eine wirkungsvolle Technik, die neben der Applikation in vitro, ein mögliches therapeutisches Potenzial in vivo hat.