Basale Core Promoter und Precore Mutationen im Hepatitis B Virus Genom steigern die Virusreplikation von Lamivudin-resistenten Mutanten

Einleitung: Bei chronischer Infektion mit dem Hepatitis B Virus (HBV) werden häufig Virusmutanten selektiert, die wenig oder kein HBeAg bilden. Die Precore-Mutationen G1896A+C1858T (keine HBeAg Expression wegen eines Stop-Codons) oder die Mutationen A1762T/G1764A im basalen Core Promoter (translationale Reduzierung der HBeAg Bildung) sind in der Mehrzahl der HBeAg negativen Patienten mit chron. HBV Infektion nachweisbar. Unter Therapie mit Lamivudin (LMV) werden oft medikamentenresistente Virusstämme mit einzelner (rtM204I) oder doppelter (rtL180M+rtM204V) Mutation im Polymerase-Gen selektiert. Methoden: Replikationskompetente HBV-Vektoren (Genotyp A) mit verschiedenen Kombinationen aus Mutationen des Core-Bereichs (Wildtyp, Precore=PC, basaler Core Promoter=BCP) und Polymerase Gens (Wildtyp, rtM204I, rtL180M/M204V) wurden in Zellkultur auf Replikationsrate (HBV-RNA, Progeny-DNA, Polymerase Aktivität, Proteinexpression, HBV-Kopienzahl im Überstand) und Medikamentenresistenz getestet. Ergebnisse: Konstrukte mit alleiniger PC-Mutation replizierten auf Wildtyp-Niveau, während BCP-Mutationen die Replikation steigerten. Vektoren mit alleiniger LMV-Resistenz zeigten eine verminderte Replikationsfähigkeit. In Kombination mit der PC-Mutation wird die Replikation LMV-resistenter Stämme hingegen auf Wildtyp-Niveau gesteigert. Kombinationsmutanten aus BCP plus LMV-Resistenz replizierten sogar stärker als HBV-Wildtyp, ohne die Medikamentenresistenz zu verändern. Alle neun untersuchten HBV-Konstrukte waren gegenüber Adefovir vergleichbar empfindlich. Schlussfolgerungen: Precore und basale Core Promoter Mutationen können die Replikationsrate von LMV-resistenten Stämmen erhöhen, ohne die Medikamentenresistenz zu beeinflussen. Die engmaschige virologische Beobachtung von HBeAg negativen Patienten unter LMV-Therapie ist daher empfehlenswert. Adefovir scheint eine effektive therapeutische Option zu sein, wenn Kombinationsmutationen im Core- und Polymerase-Gen auftreten.

Key words

Adefovir - Basal Core Promoter - HBV - Hepatitis B Virus - Lamivudin - Precore - YMDD