Senologie - Zeitschrift für Mammadiagnostik und -therapie 2013; 10 - A42
DOI: 10.1055/s-0033-1347577

Erweiterte Vierfarbenanalyse von zirkulierenden epithelialen Zellen beim frühen und späten Brustkrebs

L Habets 1, W Körber 1, B Frenken 1, I El Ghali 1, M Danaei 2, M Kusche 3, U Peisker 4, K Pachmann 5
  • 1Metares E.V, Aachen, NRW
  • 2Brustzentrum Aachen-Kreis Heinsberg, Senologie Marienhospital, Aachen, NRW
  • 3Brustzentrum Aachen-Kreis Heinsberg, Gynäkologie Marienhospital, Aachen, NRW
  • 4Brustzentrum Aachen-Kreis Heinsberg, Senologie St Josefhospital, Erkelenz, NRW
  • 5TZB Bayreuth, Bayreuth, Bayern

Basierend auf der MAINTRAC Technologie (Ery-Lyse und fluorometrische Detektion und Analyse am Olympus ScanR) implementierten wir eine 4 Farben Analyse auf dem FlowSight (AMNIS) Gerat.Neben der Einzelzelldetektion und Analyse erlaubt die IDEAS Analyse Software darüberhinaus die Detektion von mehrzelligen Zellkomplexen (Tumorzellaggregate).Unsere vorhergehenden Arbeiten mit der Dreifarbenanalyse hatte gezeigt das es epitheliale Zellen mit EMT (epithelial mesenchymale Transition) und Stammzelleigenschaften gibt. Die Vierfarbenanalyse ermöglicht jetzt eine erweiterte Analyse. Das Standardpanel bestehend aus EPCAMaf660, CD45pe, ALDH1fitc und DAPI erlaubt eine Selektion lebender EPCAMpositive Stammzellen (EPCAMpos, ALDH1pos, CD45neg, DAPIneg) und EPCAMnegative Stammzellen. In Paralellansatzen können aus der gleichen Probe andere Merkmale (HER2, ER und PDL1) oder metabolische Marker (HIF1, Carboanhydrase9, betacatenin und PARP1) untersucht werden. Bisher führten wir bei 48 Patienten mit primären Brustkrebs und 52 Patienten mit metastasierten Brustkrebs die erweiterte Analyse durch. Wir sehen wie bereits bei der Dreifarbenanalyse unterschiedlichste Muster und Zellzahlen. Die Analysesoftware erlaubt eine eingehende Analyse dieser unterschiedlichen Expressionsmuster. Die vorläufigen Ergebnisse zeigen unter anderen, dass wenn auch hohe EPCAM positive Zellen vorhanden sind die Zahl an lebenden Stammzellen sehr niedrig oder Null sein kann. Beim fortgeschrittenen Brustkrebs finden wir bei Patienten mit wenig progredienten Verlauf höhere Zellzahlen, die unter einer Therapie auch zurückgehen. Bei aggressiven Verläufen finden wir nur wenige oder gar keine EPCAM positive Zellen. Die Analyse der anderen Populationen (EPCAMnegative Stammzellen, Zellaggregate werden noch durchgeführt. Zusammenfassend lässt sich feststellen dass die Vierfarbenanalyse neue Einblicke in das Verhalten von zirkulierenden epithelialen Zellen geben wird. Darüberhinaus wird die Detektion von neuen therapierelevanten Marker möglich.