Die Aktivierung von RIG-I-like Helikasen (RLH) in Pankreaskarzinomzellen führt zu immunogenem Tumorzelltod

Hintergrund: Die Infiltration von Pankreaskarzinomen mit T-Zellen korreliert mit einer günstigeren Prognose. Dem steht jedoch eine vom Tumor ausgehende Immunsuppression entgegen. Apoptose ist meistens immunologisch „still“. Beim immunogenen Zelltod hingegen kommt es durch die Freisetzung von Gefahrensignalen sterbender Zellen zu einer Aktivierung von dendritischen Zellen (DC) und konsekutiv zu einer adaptiven T-Zellantwort. Wir untersuchten die immunologischen Konsequenzen von Apoptose, welche in Pankreastumorzellen durch Aktivierung der RLH retinoic acid-inducible gene I (RIG-I) und melanoma differentiation-associated antigen 5 (MDA5) ausgelöst wurde.

Methoden: Um Apoptose zu induzieren wurden murine Panc02 Zellen mit Liganden von RIG-I (5'-Triphosphat modifizierte RNA) oder MDA5 (polyinosinic-polycytidylic acid) transfiziert. Die apoptotischen Tumorzellen wurden mit verschiedenen DC-Populationen aus Wildtyp und knock-out Mausstämmen kokultiviert und bezüglich Antigenaufnahme, Zytokinproduktion, Expression von Oberflächenmarkern und Fähigkeit zur Antigenpräsentation analysiert.

Ergebnisse: Aktivierung von RLH in Panc02 Zellen führte zur Produktion von IFN-β und CXCL10, sowie zu effektiver Apoptose. Zudem setzten die Tumorzellen Gefahrensignale wie HMGB1 frei und wurden effektiv von CD8a⁺ DC phagozytiert. DC aus Kokulturen mit apoptotischen Tumorzellen zeigten eine Hochregulation der kostimulatorischen Moleküle CD69, CD80 und CD86, sezernierten IL-6 und CXCL10 und aktivierten tumorreaktive zytotoxische T-Zellen. Wie Versuche mit DC aus diversen knock-out Mäusen zeigten, waren an der DC-Aktivierung weder Toll-like Rezeptoren (TLR) noch RIG-I-like Helikasen beteiligt. Inhibitorstudien legen einen Syk-vermittelten Mechanismus nahe.

Schlussfolgerung: RLH induzieren in Pankreaskarzinomzellen einen immunogenen Zelltod, der zur Aktivierung und Präsentation von tumorassoziiertem Antigen durch DC führt. Der Mechanismus der DC-Aktivierung ist Gegenstand aktueller Untersuchungen.