Senologie - Zeitschrift für Mammadiagnostik und -therapie 2012; 9 - A53
DOI: 10.1055/s-0032-1313419

mikroRNA-abhängiges ‚targeting‘ von Syndecan-1 verstärkt die Motilität und Invasivität von Mammakarzinomzellen durch Rho-GTPase- und E-cadherin-abhängige Mechanismen

M Götte 1, S Ibrahim 1, G Yip 2, C Neubauer 1, C Stock 3
  • 1Universitätsklinikum Münster, Klinik für Frauenheilkunde und Geburtshilfe, Münster, Deutschland
  • 2National University of Singapore, Department of Anatomy, Singapur, Singapur
  • 3Universitätsklinikum Münster, Physiologie, Münster, Deutschland

Zielsetzung: mikroRNAs sind posttranskriptionale Regulatoren der Genexpression, welche beim Mammakarzinom häufig fehlreguliert sind. Eine hohe Expression des Proteoglykans Syndecan-1, einem vermuteten Zielgen der prometastatischen oncomiR miR-10b, korreliert mit ungünstigen prognostischen Parametern beim Mammakarzinom. Ziel der Studie war eine in vitro-Untersuchung des Zusammenwirkens von miR-10b und Syndecan-1 in den Mammakarzinomzellinien MDA-MB-231 und MCF-7.

Methoden: MDA-MB-231 und MCF-7-Zellen wurden transient mit pre-miR-10b, Syndecan-1 siRNA oder Kontrollreagentien transfiziert. Verändertes Zellverhalten wurde mittels Proliferations-, Migrations, und Matrigel-Invasionsassays sowie Video- und Konfokalmikroskopie untersucht. Veränderungen der Gen- und Proteinexpression wurden mittels Affymetrix-Array, qRT-PCR und Western blotting verifiziert.

Ergebnisse: miR-10b bewirkte eine Herabregulierung der Syndecan-1-Expression, welche mit verstärkter Tumorzellmigration und -Invasivität, sowie erhöhter Zellproliferation korrelierte. Syndecan-1-Depletion induzierte eine Fehlregulierung der Expression von Proteasen, Proteaseinhibitoren, Zytoskelettelementen und Zell-Zelladhäsionsmolekülen wie E-cadherin, welche die Grundlage der erhöhten Invasivität und Motilität Sdc1-defizienter Zellen bilden könnte. Hierbei wurde als weitere mechanistische Komponente eine erhöhte Aktivierung von Rho-GTPasen sowie der ‚Focal Adhesion Kinase', welche als Bindungspartner von Syndecan-1- fungiert, identifiziert und mittels Videomikroskopie auf funktioneller Ebene bestätigt.

Schlussfolgerungen: Syndecan-1 ist ein neues Zielgen der oncomiRNA miR-10b. Die Rho-GTPase abhängige Modulation der Zytoskelettfunktion sowie eine Herabregulation der E-cadherin-Expression wurden als relevante Effektoren der miR-10b-Syndecan-1-Achse identifiziert, welche eine neue Zielstruktur für die Entwicklung neuer therapeutischer Ansätze beim Mammakarzinom darstellen könnten.