Endothelinrezeptorblockade und ihre Effekte auf die LOX-1-Expression bei Amiodaron induzierter Lungenfibrose bei Ratten

Einleitung: Erhöhte Expression von Endothelin-1 (ET-1) führt u.a. zu chronischer Entzündung, einer erhöhten Expression des Rezeptors für oxidiertes „low density lipoprotein“ (LDL), LOX-1, und in ET-1-überexprimierenden transgenen Mäusen zur Ausbildung von Lungenfibrose. Die Rolle von LOX-1 bei der Amiodaron (Amio) induzierten Lungenfibrose ist unbekannt.

Methoden: Amio (1,83µM) wurde sechs bis acht Wochen alten, männlichen Sprague Dawley (SD)-Ratten intratracheal appliziert (Tage 0 und 2). Die Tiere erhielten täglich Bosentan (Bos, 100mg/kg) oder Sitaxsentan (Sitaxs, 5mg/kg) für 35 Tage über eine Schlundsonde. Tiere, die Amio plus Bos oder Sitaxs erhielten, wurden für drei Tage mit Bos oder Sitaxs vor der Amiodaronapplizierung vorbehandelt. Gesamt-RNA wurde mit Standardmethoden isoliert. LOX-1 und Präproendothelin-1 (ppET-1) mRNA-Expression wurde mit reverser Transkriptions-PCR, bezogen auf die Expression von Beta-Aktin, quantifiziert.

Ergebnisse: Amio hatte keine signifikanten Effekte auf die Expression von ppET-1 und LOX-1 (Lunge, Niere) im Vergleich zur Kontrolle. Die kardiale Expression von ppET-1 (P<0,05) und LOX-1 (P=0,057) war in Amio behandelten Tieren erhöht. Weder Sitaxs noch Bos allein hatten signifikante Effekte auf die LOX-1-Expression (Lunge, Niere, Herz). Bos erhöhte die Expression von LOX-1 und ppET-1 in Lunge und Herz, Sitaxs im Herz von Amio behandelten Tieren. Sitaxs hatte keinen signifikanten Effekt auf die LOX-1-Expression (Lunge) von Amio behandelten Tieren.

Diskussion: Amio plus Bos oder Sitaxs scheint die LOX-1-Expression in Lunge und Herz über einen noch unbekannten Mechanismus zu erhöhen.

Tabelle 1. LOX-1 und PräproET-1 mRNA-Expressionen nach 35 Tagen. Mittelwerte±Standardabweichung wurden mit Kruskal-Wallis ANOVA, Bonferronis t-Test (Lunge) oder Dunns Test (Herz) analysiert (Signifikanz bei P<0,05). * P<0,05 vs. Kontrolle, ‡ P<0,05 vs. Amio/Bos, † P<0,05 vs. Sitaxs.

Gruppe	Lunge	Herz	Niere
	LOX-1/Beta-Aktin
Kontrolle (n=7)	0,025±0,005	0,019±0,014	0,009±0,003
Amio (n=11)	0,023±0,019	0,048±0,035	0,014±0,012
Amio/Bos (n=6)	0,047±0,015*	0,066±0,020	0,015±0,008
Bos (n=6)	0,034±0,010	0,030±0,025	0,011±0,004
Amio/Sitaxs (n=5)	0,019±0,007	0,049±0,025*†	0,015±0,003
Sitaxs (n=6)	0,034±0,014	0,024±0,011	0,016±0,006
	PräproET-1 (Prozent der Kontrolle)
Kontrolle (n=7)	100 (39–258)	100 (29–346)	100 (47–213)
Amio (n=11)	97 (19–479)	217 (14–711)*	139 (31–318)
Amio/Bos (n=6)	208 (34–1273)	258 (133–503)*	159 (45–558)
Bos (n=6)	79 (16–392)	91 (27–307)‡	98 (31–305)
Amio/Sitaxs (n=6)	78 (42–145)	133 (11–864)	145 (59–171)
Sitaxs (n=5)	104 (47–233)	130 (48–207)	132 (69–144)