Die intratumorale Injektion von IL-12- oder CD40L-exprimierenden dendritischen Zellen (DC) verändert das immunsuppressive Tumormilieu und steigert die antitumoralen Effekte einer Vakzinierung mit AFP-beladenen DC in einem HCC Modell in vivo.

Einleitung: Dendritische Zellen (DC) sind antigenpräsentierende Zellen, die antigenspezifisch T-Zellen gegen Tumorantigene, wie AFP (α-Fetoprotein), stimulieren können. Ein immunsuppressives Tumormilieu und die Anreicherung mit immunsupprimierenden Zytokinen können die antitumorale Wirksamkeit der DC stark herabsetzen. In dieser Arbeit wird versucht, dem entgegenzuwirken durch die intratumorale (i.t.) Injektion potenter Th1-Zytokine oder ko-stimulatorischer Moleküle, wie IL-12 oder CD40L, kombiniert mit einer subkutanen (s.c.) Vakzinierung durch AFP-beladene DC, um so eine effektivere tumorspezifische Immunantwort zu induzieren.

Methodik: DC wurden aus dem Knochenmark von C3H-Mäusen gewonnen und adenoviral (Ad-AFP, Ad-CD40L, Ad-IL-12 oder Ad-LacZ) transduziert. Zur Tumorinduktion wurden 10⁶ AFP-positive Hepa129-Zellen s.c. in die rechte Flanke von C3H-Mäusen injiziert. Die Behandlung erfolgte durch s.c. Inokulation von AFP-beladenen DC kombiniert mit der i.t. Injektion von 10⁶ IL-12-, CD40L- oder LacZ-exprimierenden DC. Um Veränderungen im Tumormilieu zu untersuchen, wurden die Tumore durchflusszytometrisch und auf unterschiedliche Zytokinexpression untersucht.

Ergebnisse: Eine Vakzinierung mit AFP-beladenen DC induzierte eine signifikante Inhibition des Tumorwachstums von subkutanen HCC, allerdings keine komplette Tumorremission. Dagegen erzielte die Kombination aus s.c.-Injektion von AFP- mit i.t.-Injektion von IL-12-DC eine Tumoreliminierung bei >90% der Tiere und mit i.t.-Injektion von CD40L-DC bei 63% der Tiere. Tumore, die mit IL-12-DC oder CD40L-DC i.t. behandelt wurden, wiesen deutlich mehr CD4, CD8 und NK T-Zellen auf, sowie eine erhöhte Expression von Th1-Zytokine, (IL-12, IFNγ), und Chemokine (MIP-2). Interessanterweise zeigten die Tumoren, die mit IL-12-DC behandelt wurden, eine signifikante Reduktion von regulatorischen T-Zellen.

Diskussion: Unsere Daten zeigen, dass IL-12- oder CD40L-exprimierenden DC das immunsuppressive Tumormilieu von etablierten HCC effektiv verändert und somit das Tumorwachstum durch Rekrutierung von CD4, CD8 und NK-Zellen inhibiert werden kann. In Kombination mit AFP-exprimierenden DC konnte dieser Effekt nochmals gesteigert werden, wahrscheinlich über die Rekrutierung tumorspezifischer Effektorzellen.