Synergistische antitumorale Wirkung von AFP-beladenen und CD40L-exprimierenden Dendritischen Zellen in etablierten hepatozellulären Tumoren in vivo

Einleitung: Dendritische Zellen (DC) sind professionelle Antigen-präsentierende Zellen, die eine spezifische T-Zell-vermittelte Immunantwort gegen Tumorassoziierte Antigene (TAA), wie das Alpha-Fetoprotein, bei HCC induzieren können. Allerdings ist ihr Potenzial im Patienten begrenzt. CD40L ist ein kostimulatorisches Molekül und essentiell für Antigen-spezifische T-Zell-Antworten. In dieser Arbeit wurde die Kombination einer intratumoralen (i.t.) Injektion von CD40L-DC und einer subkutanen (s.c.) Impfung mit AFP-DC in HCC untersucht.

Methodik: DC wurden aus Knochenmark von C3H-Mäusen gewonnen und an Tag 6 mit Adenoviren (Ad-CD40L, Ad-AFP, Ad-LacZ als Kontrolle) transduziert. 10⁶ AFP-positive Hepa129-Zellen wurden s.c. in die rechte Flanke der Mäuse injiziert. Bei einem Tumorvolumen von 100–150mm³ erfolgte eine s.c. Impfung mit 10⁶ AFP-beladenen DC. An Tag 9 folgte eine zweite AFP-Impfung und eine i.t. Injektion mit 10⁶ CD40L-exprimierenden DC.

Ergebnisse: Die Kombination, s.c. Impfung mit AFP-DC und i.t. Behandlung mit CD40L-DC, zeigte eine signifikante Inhibition des Tumorwachstums im Vergleich zu den Kontrollgruppen: 20 Tage nach Tumorinduktion betrug das Tumorvolumen 430±347mm³ in der s.c. AFP-DC/i.t. CD40L-Gruppe vs. 1650±350mm³ der s.c. LacZ-DC/i.t. CD40L-Tiere (p<0,05). In der AFP/CD40L-Gruppe konnte eine komplette Tumorregression von 62,5% der Tiere vs. 37,5% in den Kontrollgruppe erzielt werden. Die i.t. CD40L-DC behandelten Tumoren zeigten eine signifikant stärkere Infiltration von CD4+-, CD8+-T- and NK-Zellen, eine stärkere Expression von Th1-Zytokinen (IL-12, IFN-gamma), sowie eine höhere Apoptoserate (p<0,05).

Diskussion: Unsere Daten zeigen, dass die i.t.-Gabe von CD40L-DC ein entzündliches und apoptotisches Tumormilieu in etabliertem HCC induziert. Dies scheint die antitumorale Wirkung einer AFP-Impfung zu verbessern. Diese Ergebnisse befürworten die Anwendung von CD40L in Kombination mit TAA-gepulsten DC zur Immuntherapie von HCC.