Interaktion von Hepatitis C Virus mit p53 Familie-induzierten Apoptosesignalwegen

Einleitung: Die chronische Hepatitis C Virus (HCV) Infektion stellt eine Hauptursache für die Entwicklung eines hepatozellulären Karzinoms (HCC) dar. Wir konnten bisher zeigen, dass die p53/p63/p73 Familie eine zentrale Rolle in Entwicklung, Therapieansprechen und Prognose des HCC spielt und dass die Hochregulation antiapoptotischer (dominant-negativer, transkriptionell inaktiver) Formen der p53 Familie (DNp73) beim HCC mit vermindertem Überleben korreliert.

Ziel: Ziel ist es, den Einfluss einer Hepatitis C Virus Infektion auf die p53-abhängige Apoptose zu untersuchen.

Methodik: Wir haben das infektiöse Zellsystem mit dem HCV Konstrukt JC1 (2a/2a Chimäre), sowie Expressionsplasmide verschiedener HCV-Proteine verwendet. Überexpression von wtp53/TAp73 und DNp73 erfolgte mittels adenoviralem Transfer, Silencing mittels RNAi. Nach HCV Infektion bzw. transienter Expression wurde die transkriptionelle Aktivierung von p53 Zielgenen mittels qPCR und Luciferase-Reporter Assay ermittelt. Virustiter und HCV RNA wurden mittels Immunhistochemie und qPCR bestimmt.

Ergebnisse: Kombinierte Expression von HCV und wtp53, sowieTAp73 führen zu einer Synergie in der Transaktivierung der p53 Zielgene CD95 und BAX. Damit wird sowohl die extrinisisch/Rezeptor-vermittelte, sowie die intrinsisch/mitochondrial-vermittelte Apoptose aktiviert. Die Überexpression von DNp73 hemmt die Transaktivierung und wirkt dadurch antiapoptotisch. In Übereinstimmung hierzu führt im „klinisch relevanteren“ infektiösen Zellkultursystem die Überexpression von TAp73 zu einer Abnahme der Infektiosität von HCV. Blockade von TAp73 durch RNA-Interferenz oder Überexpression von DNp73 führt hingegen zu einer Zunahme der Infektiosität von HCV.

Schlussfolgerung: HCV, p53 und TAp73 kooperieren hinsichtlich der Aktivierung von p53-abhängigen Apoptose-Zielgenen. DNp73 wirkt hierzu antagonistisch und hemmt die Apoptose der HCV-infizierten Leberzelle. Die Wechselwirkung zwischen dem Hepatitis C Virus und den dominant negativen Formen der p53 Familie könnte eine Erklärung darstellen für Viruspersistenz und Tumorentwicklung. Somit könnte die Entwicklung einer spezifischen, auf die p53 Familie zielenden, Apoptose-induzierenden Therapie eine neue Strategie in der Anti-HCV und Anti-HCC Therapie darstellen.