Die kombinierte Applikation von AFP- und IL-12-exprimierenden DC führt zur Tumorregression und zur Verlängerung des Überlebens im subkutanen sowie im orthotopen HCC Modell in vivo

Einleitung: Dendritische Zellen (DC) sind antigenpräsentierenden Zellen, die antigenspezifische T-Zellen gegen Tumorantigene wie AFP (α-Fetoprotein), stimulieren können. Ein immunsuppressives Tumor-Milieu mit der Anreicherung immunsupprimierender Zytokine wie VEGF, IL10 oder TGF-β können die antitumorale Wirksamkeit der DC stark herabsetzen.

Ziele: Ziel war es daher, diesem Effekt durch die intraperitoneale bzw. intratumorale Injektion von IL12 exprimierenden DC in Kombination mit AFP-beladenen DC entgegenzuwirken, um so eine effektivere tumorspezifische Immunantwort zu induzieren.

Methodik: DC wurden aus dem Knochenmark von C3H-Mäusen gewonnen und adenoviral mit AdLacZ, AdAFP oder AdIL12 transduziert. Zur Induktion sc. Tumore wurden 10⁶ AFP-positive Hepa129-Zellen sc. in die rechte Flanke von C3H-Mäusen injiziert. Im orthotopen Modell wurden 10⁵ Zellen nach Laparotomie in den linken Leberlappen injiziert. Die Behandlung erfolgte durch sc. Injektion von AFP-exprimierenden DC kombiniert mit der intratumoralen bzw. intraperitonealen Injektion von 10⁶ IL12- oder LacZ-exprimierenden DC. Tumorwachstum, mittleres Überleben sowie das Auftreten von maligner Aszites wurden dokumentiert.

Ergebnis: Die Kombination aus sc. Inokulation von AFP- mit it. Injektion von IL12-DC führte zur Tumoreliminierung bei 90% der Tiere. Mit IL-12-DC behandelte Tumorhomogenate, wiesen in der Durchflusszytometrie deutlich mehr CD4⁺, CD8⁺ und NK T-Zellen auf. Die Kombination aus sc. AFP- und ip. IL12-DC führte im orthotopen Tumormodell zu einer signifikanten Verlängerung des Überlebens im Vergleich zu AFP/LacZ- bzw. LacZ/LacZ-DC (Tag 28: 65%, 20% und 0% Überleben). Bei 20% der tumortragenden Tiere kam es zu einer kompletten Tumorregression. Alle Kontrollmäuse entwickelten malignen Aszites als Zeichen für eine Tumorprogression im Vergleich zu 30% der mit IL-12-DC behandelten.

Schlussfolgerung: Unsere Daten zeigen, dass durch die Gabe von IL12-exprimierenden DC das immunsuppressive Tumormilieu effektiv durch Rekrutierung von CD4⁺, CD8⁺ und NK-Zellen verändert und somit das sc. Tumorwachstum nahezu komplett inhibiert werden kann. In Kombination mit AFP-exprimierenden DC konnte dieser Effekt nochmals gesteigert werden über die Rekrutierung tumorspezifischer Effktorzellen.