Diabetologie und Stoffwechsel 2010; 5 - P244
DOI: 10.1055/s-0030-1253972

mRNA-Expressionsprofile neuer Kandidatengene für Glukosehomöostase im Fettgewebe der Maus

A Lachmann 1, N Klöting 1, M Kern 1, A Tönjes 1, M Stumvoll 1, P Kovacs 2, M Blüher 1
  • 1Universität Leipzig, Medizinische Fakultät, Endokrinologie/Diabetes, Leipzig, Germany
  • 2Universität Leipzig, Interdisziplinäres Zentrum für Klinische Forschung, Leipzig, Germany

Fragestellung: In einer genomweiten Assoziationsstudie wurden kürzlich zehn neue Genloci identifiziert, die bezogen auf die quantitative Merkmale Nüchternglukose, Nüchterninsulin, Betazellfunktion (HOMA-B) und Insulinresistenz (HOMA-IR) mit Diabetes eng verbunden sind. Wir wählten innerhalb dieser Genloci drei Kandidatengene (Adenylatzyklase Typ V/ADCY5, Cryptochrome 2/CRY2 und Fettsäuredesaturase 1/FADS1) und untersuchten ihre mRNA-Expression im Fettgewebe von Mäusen. Außerdem sollte überprüft werden, ob eine Hochfett-Diät (HFD) die mRNA-Expressionsprofile beeinflussen kann.

Methodik: Jeweils acht gesunden männlichen Mäusen verschiedener Stämme (129s6/SvEvTac und C57Bl6Tac (Taconic, Germantown, NY) sowie C57Bl6Rj (Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME)) wurde HFD- (N=4) bzw. Standardfutter (SD, N=4) verabreicht. Nach zehn Wochen wurde das perigonadale und subkutane Fettgewebe entnommen. Unter Verwendung kommerziell erhältlicher Kits wurde totale RNA gewonnen (TRizol, Invitrogen, Karlsruhe) und in cDNA (Super Script II, Invitrogen) umgeschrieben. Die mRNA-Expression der Kandidatengene ADCY5, CRY2 und FADS1 wurde anschließend unter Verwendung von FAM-TAMRA-Sonden der Firma Applied Biosystems Inc. (ABI) durch Real Time PCR (RT-PCR; ABI PRISM sequence detection system 7000, ABI, Foster City, CA, USA) bestimmt. 18S rRNA wurde als endogene Kontrolle verwendet.

Ergebnisse: Die mRNA-Expression war für alle Kandidatengene in den untersuchten Fettdepots beider Fütterungsgruppen detektierbar. Eine HFD resultierte in einer verminderten mRNA-Expression von FADS1 in beiden Fettdepots. Im Gegensatz dazu war die mRNA-Expression von ADCY5 und CRY2 nur im subkutanen Fettgewebe vermindert und im viszeralen Fettgewebe erhöht.

Schlussfolgerungen: Die mRNA-Expressionsprofile der Kandidatengene zeigten eine ernährungsabhängige Regulation. Diese Gene könnten folglich neue therapeutische Targets in der Behandlung von Insulinresistenz und beeinträchtigtem Glukosemetabolismus darstellen. Studien in humanen Fettgewebsproben von ca. 170 Probanden werden im Moment durchgeführt, um diese Ergebnisse zu bestätigen.