Antimitochondriale Antikörper (AMA) bei der primär-biliären Zirrhose (PBC) reagieren in erster Linie mit Epitopen der katalytischen Domäne der E2-Untereinheit des Pyruvat-Dehydrogenase Komplexes (PDH-E2)

AMA bei der PBC (anti-M2) reagieren mit Untereinheiten des α-Ketosäure-Dehydrogenase-Komplexes der inneren Mitochondrienmembran, insbesondere mit PDH-E2. Peptide im Bereich der inneren Lipoyldomaine (ILD), die das lipoyl-bindende Lysin K173 enthalten (Peptid 167–184 oder 165–178) wurden als immundominante Epitope definiert, aber es wurde auch gezeigt, dass Konformationsepitope eine wichtige Rolle spielen. Ziel der vorliegenden Arbeit war, zu überprüfen, ob auch Peptide außerhalb der ILD von anti-M2/PDH-E2 Antikörpern erkannt werden. Seren von 95 Patienten mit gesicherter anti-M2 positiver PBC wurden im ELISA auf ihre Reaktivität gegenüber 33 synthetischen überlappenden Peptiden (jeweils 25 Aminosäuren), die die gesamte Länge der PDH-E2 abdeckten, getestet. Ferner wurde das Peptid 167–184 an Ovalbumin gekoppelt und in einer lipoylierten und nicht-lipoylierten Form eingesetzt. Als Kontrolle dienten Seren von 22 Blutspendern und 63 Patienten mit anderen Lebererkrankungen. Von den 95 PBC-Seren reagierten 74% mit einem Peptid 475–499 und 58% mit einem Peptid 407–431, die beide in der katalytischen Domäne des PDH-E2 Komplexes lokalisiert sind. Antikörper gegen nicht-lipoyliertes und lipoyliertes Peptid 167–184 der ILD wurden in 5 bzw. 11% gefunden. Bei Verwendung von Ovalbumin-gekoppelten Peptiden stieg die Häufigkeit positiver Reaktionen auf 57% (nicht-lipoylierte Form). Die Antikörperreaktivität gegen die Peptide 475–499 und 407–431 war in PBC Seren signifikant höher als in Seren von Patienten mit anderen Lebererkrankungen. Diese Ergebnisse zeigen, das lineare Epitope innerhalb der katalytischen Domäne des PDH-E2häufiger erkannt werden als das bisher als immundominant identifizierte Peptid 167–184 innerhalb der ILD. Interessanterweise enthält das Peptid 475–499 das aktive Zentrum Ser480 innerhalb des katalytischen Zentrums des Enzyms.

PBC - AMA - anti-M2