Z Gastroenterol 2009; 47 - P362
DOI: 10.1055/s-0029-1241608

Der Transkriptionsfaktor ITF-2A induziert den Zellzyklusarrest über p21Cip1

A Herbst 1, S Helferich 1, A Behrens 1, M Dahlhoff 2, M Schneider 2, B Göke 1, F Kolligs 1
  • 1Medizinische Klinik II, Klinikum Großhadern, München, Germany
  • 2Genzentrum, Universität München, München, Germany

Einleitung: Das ITF2-Gen kodiert zwei basic helix-loop-helix Transkriptionsfaktoren, ITF-2A und ITF-2B. Die Expression der Isoform ITF-2B wird durch den Transkriptionsfaktor β-Catenin reguliert. In der kolorektalen Karzinogenese kommt es daher in Adenomen mit deregulierter β-Catenin-Aktivität zu einem Anstieg der ITF-2B-Expression. Der in Kolonkarzinomen häufig auftretende Verlust von Heterozygotie (LOH) auf Chromosom 18q21 betrifft auch das ITF2-Gen und korreliert mit dem Verlust der ITF-2B-Expression. Im Unterschied zu ITF-2B wird die Expression von ITF-2A nicht durch β-Catenin reguliert. Auch weist das Protein ITF-2A im Vergleich zu ITF-2B nur eine transkriptionelle Aktivierungsdomäne (TAD) auf und besitzt eine geringere transkriptionelle Potenz als ITF-2B.

Ziele: Die Untersuchung wurde durchgeführt, um die Expression und Funktion der Isoform ITF-2A in Kolonkarzinomen zu untersuchen und mit der Isoform ITF-2B zu vergleichen.

Methodik: Mittels Echtzeit-PCR wurde die Expression von ITF-2A mRNA in Kolonkarzinom-Zellinien, in Kolonkarzinomen sowie im Dünndarmepithel und in Adenomen von APCmin/--Mäusen gemessen. Die Funktion von ITF-2A wurde in zellulären Assays und Reportergenassays analysiert.

Ergebnis: Die Expression von ITF-2A war in der Mehrzahl der primären Kolonkarzinome und in den Kolonkarzinom-Zelllinien signifikant verringert. Re-expression von ITF-2A in den Zelllinien HCT116 und DLD1 führte zu einer Inhibition des Wachstums. Dieser Effekt war auf einen Arrest des Zellzyklusses zurückzuführen, der durch den Zellzyklusinhibitor p21Cip1 vermittelt wurde. ITF-2A induzierte die Expression von p21Cip1über E-Boxen im ersten Intron des CDKN1A-Gens.

Schlussfolgerung: Der Transkriptionsfaktor ITF-2A ist von einem Expressionsverlust in Kolonkarzinomen und Kolonkarzinom-Zelllinien betroffen. Bemerkenswerterweise ist ITF-2A trotz des Vorhandenseins von nur einer TAD in der Lage, in Kolonkarzinom-Zellinien den Zellzyklus über die Induktion des Zellzyklusinhibitors p21Cip1 zu arretieren. Der gleichzeitige Verlust von ITF-2A und ITF-2B durch LOH auf Chromosom 18q21 bietet daher Kolonkarzinomzellen einen Selektionsvorteil. Zusammengefasst unterstreichen die Daten für die Isoform ITF-2A die Bedeutung von ITF-2 als Tumorsupressorgenkandidaten auf Chromosom 18q21.