Bacteriological investigation of milk samples and biopsies from the mammary gland of healthy sows

Abstract

Objective Milk samples from clinically healthy sows often contain a similar bacterial content as samples from mastitic sows. To verify whether contamination during sample collection is a possible reason for this or bacterial content in the mammary gland postpartum is a regular finding, the aim of the present study was to compare the suitability of milk samples and mammary gland biopsies for assessing the bacteriological status of healthy sows.

Material and methods Twenty-five clinically healthy sows of different parities were selected. The mammary skin and teats were cleaned and disinfected before biopsies and milk samples were taken from the second mammary gland on the left udder side one day postpartum. Needle biopsies were performed after local anaesthesia. Samples were investigated bacteriologically for aerobic bacteria and a semi-quantitative classification of bacterial growth was carried out. Additionally, formalin-fixed paraffin-embedded biopsies from 18 of the healthy sows were stained and scored for inflammatory cells.

Results A low bacterial content could be found in 96 % of milk samples and in 92 % of biopsies from the healthy sows. Both Gram-positive (mostly streptococci and staphylococci) and Gram-negative bacteria (Escherichia coli) were detected. Histopathological examination revealed mild inflammatory cell infiltration with mainly plasma cells and lymphocytes, in rare cases neutrophilic granulocytes.

Conclusion Biopsies of the mammary gland provided similar results with regard to bacteriological investigation compared to milk sampling although these were collected under aseptic conditions. Therefore, it is assumed that ubiquitous bacteria are regularly present in the colostrum and in the mammary gland tissue of clinically healthy sows after parturition. Histopathological findings were not entirely uneventful.

Clinical relevance Milk samples and biopsies from the thoroughly cleaned and disinfected mammary gland indicate a regular bacterial load of the gland postpartum; biopsies do not provide advantages with regard to hygienic conditions.

Zusammenfassung

Gegenstand und Ziel Milchproben von klinisch gesunden Sauen enthalten häufig einen ähnlichen Keimgehalt wie Sauen mit Mastitis. Um festzustellen, ob eine Kontamination während der Probenentnahme als Ursache in Frage kommt oder ob Bakterien regelmäßig im Gesäuge nach der Geburt vorkommen, war das Ziel der vorliegenden Studie, Milchproben und Gesäugekomplexbiopsien klinisch gesunder Sauen vergleichend auf die Eignung des Probenmaterials für die bakteriologische Kontrolle zu überprüfen.

Material und Methoden Bei 25 klinisch gesunden Sauen unterschiedlicher Parität erfolgte die Entnahme von Biopsien und Milchproben jeweils am zweiten Komplex der linken Gesäugeseite einen Tag post partum nach Reinigung und Desinfektion der Zitzen- und Gesäugehaut. Biopsien wurden mithilfe einer Biopsienadel nach Lokalanästhesie entnommen. Die Proben wurden bakteriologisch auf ihren aeroben Keimgehalt untersucht und es wurde eine semiquantitative Bestimmung des Keimgehaltes vorgenommen. Zusätzlich wurden Formalin-fixierte Paraffin-Schnitte der Gewebebiopsien von 18 der Sauen histologisch auf Entzündungszellen untersucht.

Ergebnisse In 96 % der Milchproben und 92 % der Biopsien der gesunden Sauen konnte ein geringer Keimgehalt gefunden werde. Es wurden sowohl Gram-positive (vorwiegend Streptokokken und Staphylokokken) als auch Gram-negative Bakterien (Escherichia coli) nachgewiesen. Bei histopathologischen Untersuchungen konnten geringe Entzündungszellinfiltrationen, hauptsächlich bestehend aus Plasmazellen und Lymphozyten, selten aus neutrophilen Granulozyten, nachgewiesen werden.

Schlussfolgerung Biopsien von Milchdrüsen lieferten für die bakteriologische Untersuchung im Vergleich zu Milchproben ähnliche Ergebnisse, obwohl sie unter aseptischen Bedingungen entnommen wurden. Es ist anzunehmen, dass ubiquitäre Keime regelmäßig in der Milch und im Milchdrüsengewebe von klinisch gesunden Sauen nach der Geburt vorhanden sind, dabei waren die histopathologischen Befunde nicht völlig unauffällig.

Klinische Relevanz Milchproben und Proben aus dem Drüsengewebe von Sauen, die aus gründlich gereinigten und desinfizierten Gesäugekomplexen gewonnen werden, weisen nach der Geburt auf einen regelmäßigen Keimgehalt in der Milchdrüse hin. Biopsien bieten dabei keinen Vorteil im Vergleich zu Milchproben bezüglich der hygienischen Bedingungen.

Key words

swine - colostrum - needle biopsy - mastitis - histology

Schlüsselwörter

Schwein - Kolostrum - Nadelbiopsie - Mastitis - Histologie

Fußnote

^* Both authors contributed equally.

Publikationsverlauf

Eingereicht: 01. Juni 2021

Angenommen: 27. Oktober 2021

Artikel online veröffentlicht:
02. März 2022

• References

• 1 Gerjets I, Kemper N. Coliform mastitis in sows – A review. J Swine Health Prod 2009; 17: 97-105
• 2 Ross RF, Orning AP, Woods RD. et al. Bacteriologic study of sow agalactia. Am J Vet Res 1981; 42: 949-955
• 3 Awad Masalmeh M, Baumgartner W, Passernig A. et al. Bacteriological studies of the mastitis-metritis-agalactia syndrome in Austrian pig farms. Tieraerztl Umsch 1990; 45: 526-535
• 4 Hirsch AC, Philipp H, Kleemann R. Investigation on the efficacy of meloxicam in sows with mastitis-metritis-agalactia syndrome. J Vet Pharmacol Ther 2003; 26: 355-360
• 5 Baer C, Bilkei G. Ultrasonographic and gross pathological findings in the mammary glands of weaned sows having suffered recidiving mastitis metritis agalactia. Reprod Domest Anim 2005; 40: 544-547 DOI: 10.1111/j.1439-0531.2005.00629.x..
• 6 Kemper N, Gerjets I. Bacteria in milk from anterior and posterior mammary glands in sows affected and unaffected by postpartum dysgalactia syndrome (PPDS). Acta Vet Scand 2009; 51: 26 DOI: 10.1186/1751-0147-51-26.
• 7 Kemper N, Bardehle D, Lehmann J. et al. The role of bacterial pathogens in coliform mastitis in sows. Berl Münch Tierärztl Wochenschr 2013; 126: 130-136
• 8 Martineau G-P, Le Treut Y, Guillou D. et al. Postpartum dysgalactia syndrome: A simple change in homeorhesis?. J Swine Health Prod 2013; 21: 85-93
• 9 Feghali CA, Wright TM. Cytokines in acute and chronic inflammation. Front Biosci 1997; 2: 12-16 DOI: 10.2741/a171.
• 10 Salmon H. The intestinal and mammary immune system in pigs. Vet Immunol Immunopathol 1987; 17: 367-388 DOI: 10.1016/0165-2427(87)90155-3.
• 11 Franke F. Untersuchungen zur Aetiologie der Gesaeugeaktiomykose des Schweines. Zentralbl. Bakteriol. Parasitenkd. Infektionskr. Hyg I Abt Orig A 1973; 223: 111-124
• 12 Murakami S, Kobayashi T, Sekigawa Y. Actinomyces denticolens as a causative agent of actinomycosis in animals. J Vet Med Sci. 2018; 80: 1650-1656 DOI: 10.1292/jvms.18–0207.. Epub 2018 Sep 14. PMID: 30224576
• 13 Hoyles L, Falsen E, Holmström G. Actinomyces suimastitidis sp. nov., isolated from pig mastitis. Int J Syst Evol Microbiol 2001; 51: 1323-1326 DOI: 10.1099/00207713–51–4-1323.. PMID: 11491328
• 14 Persson A, Pedersen Mörner A, Kuhl W. A long-term study on the health status and performance of sows on different feed allowances during late pregnancy – III. Escherichia coli and other bacteria, total cell content, polymorphonuclear leucocytes and pH in colostrum and milk during the first 3 weeks of lactation. Acta Vet Scand 1996; 37: 293-313
• 15 Magnusson U. Longitudinal study of lymphocyte subsets and major histocompatibility complex class II expressing cells in mammary glands of sows. Am J Vet Res 1999; 60: 546-548
• 16 Gerjets I, Reiners K, Kemper N. Study on the pathogen spectrum and analysis of risk factors for MMA in sows. In: Sustainable animal husbandry: prevention is better than cure. 14th International Congress of the International Society for Animal Hygiene (ISAH), Vechta, Germany, Proc. Vol. 2009; 1; 65-68
• 17 Pustal AJ. Providing supplementary milk during lactation: Effects on sows´ and piglets´ health and performance. [Thesis] Leipzig, Univ. Leipzig, Vet. med. Fak.; 2014
• 18 Kemper N, Preissler R. Bacterial flora on the mammary gland skin of sows and in their colostrum. J Swine Health Prod 2011; 19: 112-115
• 19 Bertschinger HU, Bürgi E, Eng V. et al. Lowering of the incidence of puerperal mastitis in the sow by protection of the mammae from contamination. Schweiz Arch Tierheilkd 1990; 132: 557-566
• 20 Krömker V, Pfannenschmidt F, Helmke K. et al. Risk factors for intramammary infections and subclinical mastitis in post-partum dairy heifers. J Dairy Res 2012; 79: 304-309 DOI: 10.1017/S0022029912000222.. Epub 2012 Jun 7
• 21 Björkman S, Han T, Oliviero C. et al. Biopsy of mammary gland in sows: A tool for studying colostrum production. Reprod Domest Anim 2018; 53 (Suppl. 02) 111-112
• 22 Akers RM, Denbow DM. eds. Anatomy and physiology of domestic animals. 1st ed.. Ames, Iowa: Blackwell Publishing; 2008
• 23 Geyer H. Milchdrüse, Mamma. In: Salomon FV, Geyer H, Gille U. eds. Anatomie für die Tiermedizin. 3 rd ed.. Stuttgart: Enke Verlag; 2015: 649-659
• 24 Chen W, Mi J, Lv N. et al. Lactation stage-dependency of the sow milk microbiota. Front Microbiol 2018; 9: 945 DOI: 10.3389/fmicb.2018.00945.
• 25 Rodríguez JM. The origin of human milk bacteria: is there a bacterial entero-mammary pathway during late pregnancy and lactation?. Adv Nutr 2014; 5: 779-784 DOI: 10.3945/an.114.007229.. Print 2014 Nov.
• 26 Daley VL, Dye C, Bogers SH. et al. Bovine mammary gland biopsy techniques. J Vis Exp. 2018 Dez 23; (142), DOI: 10.3791/58602
• 27 Chabaudie N, Le Jan C, Olivier M. et al. Lymphocyte subsets in the mammary gland of sows. Res Vet Sci 1993; 55: 351-355 DOI: 10.1016/0034-5288(93)90106-p.
• 28 Yamaguchi T, Hiratsuka M, Asai K.. et al. Differential distribution of T lymphocyte subpopulations in the bovine mammary gland during lactation. J Dairy Sci 1999; 82: 1459-1464 DOI: 10.3168/jds.S0022-0302(99)75373-7.
• 29 Osterlundh I, Hultén F, Johannisson A. et al. Sows intramammarily inoculated with Escherichia coli at parturition: I Functional capacity of granulocytes in sows affected or non-affected by clinical mastitis. Vet Immunol Immunopathol 2002; 90: 35-44 DOI: 10.1016/s0165-2427(02)00204-0..
• 30 Persson A, Pedersen Mörner A, Kuhl W. A long-term study on the health status and performance of sows on different feed allowances during late pregnancy – II. The total cell content and its percentage of polymorphonuclear leucocytes in pathogen-free colostrum and milk collected from clinically healthy sows. Acta Vet Scand 1996; 37: 279-291
• 31 Magnusson U, Rodriguez-Martinez H, Einarsson S. A simple, rapid method for differential cell counts in porcine mammary secretions. Vet Rec 1991; 129: 485-490 DOI: 10.1136/vr.129.22.485.. PMID: 1781144